熒光定量PCR技術簡介

定量PCR簡介

    熒光定量PCR技術是普通PCR技術的改良和發(fā)展，它提高了普通PCR技術的特異性和準確性，能做到實時監(jiān)控和準確定量，廣泛應用于基礎研究、臨床檢驗、海關檢疫等各個領域。

 

定量PCR服務內容

1、 合成

設計合成各種標記探針并可根據(jù)客戶要求負責探針的調試（詳見合成）

2、 檢測

mRNA表達檢測及mRNA表達譜芯片后期驗證

MicroRNA檢測及MicroRNA表達譜芯片后期驗證

SNP檢測

基因copy數(shù)檢測

病原微生物樣品檢測

3、 研發(fā)

接受采用熒光定量PCR的檢測方法針對各種檢測目標的合作研發(fā)和委托研發(fā)。

 

定量PCR實驗流程

PCR引物探針設計合成調試

標準品制作

樣本核酸抽提反轉錄

擴增檢測

數(shù)據(jù)匯總初步分析

 

定量PCR檢測周期

常規(guī)檢測任務2－3周內完成，具體情況根據(jù)要檢測的基因和樣本數(shù)而定。

 

定量PCR客戶提供

詳細的實驗要求，基因名稱等（詳見服務申請單），提供待測樣本，保證樣本質量。

 

定量PCR送樣要求

細胞（≥10 5 個）                                                 

組織（≥100mg，黃豆大小）

全血（≥0.5ml）                                                     

基因組DNA（≥5ug）

 

報定量PCR告內容

提供電泳圖片、熒光擴增曲線、標準曲線、原始報告等。

 

定量PCR應用領域

1、基礎研究

a 基因表達分析

研究目標基因（mRNA和micrRNA）的表達狀況，準確地進行定量分析。

B 基因型分析

針對相應的的等位基因或SNP位點，設計特異性的探針進行擴增檢測。

2、臨床病原微生物檢測（科研分析）

對臨床科研樣品中的細菌、病毒等病源微生物做定性定量分析。

對進出口要檢疫的病源微生物、寄生蟲做定性定量分析。

 

電泳圖譜



標準曲線



擴增曲線



溶解曲線